Análise do espaçador intergênico do gene de calmodulina em parasitas da família trypanosomatidae: potencial como marcador molecular / Intergenic spacer analysis of calmodulin gene in the family Trypanosomatidae parasites: potential as a molecular marker

Caracterização e descrição de espécie na família Trypanosomatidae ainda depende da morfologia e identidade de hospedeiros dos tripanossomatídeos. Embora vários marcadores moleculaes tenham sido descritos nas ultimas décadas nenhum deles tem sido proposto como uma ferramenta molecular definitiva para complementar a informação ministrada pelas analises morfológicas. Com objetivo de avaliar o potencial do espaçador intergenico do gene de calmodulina como marcador molecular e estudar a composição desta região nos tripanossomatídeos, foram amplificados clonados e seqüenciados os espaçadores intergênicos de Crithidia fasciculata, C. deanei, C. guilhermei, C. acanthocephali, C. luciliae, C. desouzai, Trypanosoma rangeli e comparados com as seqüências que estão publicamente disponíveis de T. brucei, T. cruzi, Leishmania mexicana, L. major, L. infantum, L. arentolae e Phytomonas serpens. Características como organização genética do gene de calmodulina, conteúdo de G+C e presença de repeto~ções de simples seqüência também foram avaliados. O gene de calmodulina mostrou estar organizado in tandem de duas a quatro copias separados por espaçadores intergenicos os quais podem apresentar variação no tamanho. Estes espaçadores mostraram pouca variação intraespecífica no seu conteúdo de G+C sem importar qualquer diferença de tamanho. Nos tripanossomatídeos monoxênicos a tendência aponta que os organismos com um espaçador intergênico maior apresentam um conteúdo maior de G+C. evidenciou-se que a presença de repetições de seqüência simples nos espaçadores, elementos vinculados com a regulação da expressão genética dos tripanossomatideos. Embora o espaçador de calmoduline mostre variabilidade entre as copias do gene, nos demonstramos que seqüências na região 5UTR localizadas imediatamente antes do códon de inicio são espécie-específicas. Uma vez que este segmento genético é de fácil amplificação e esta limitado por uma seqüência conservada (ORF), resulta factível desenvolver uma ferramenta molecular que auxilie a morfologia tradicional na identificação de espécies na família Trypanosomatidae.

Epidermal calmodulin levels in psoriasis before & after therapy.

Epidermal calmodulin (CaM) levels were measured in the involved and uninvolved skin in 26 psoriasis patients before and after treatment either with dithranol topically or methotrexate orally. The mean epidermal calmodulin levels (+/- SD) in the involved and uninvolved psoriatic skin before treatment were 21.99 +/- 10.22 and 11.97 +/- 3.50 in the patients to be treated with short contact dithranol therapy (SCDT) while it was 19.46 +/- 8.13 and 11.27 +/- 7.23 in the patients to be treated with systemic methotrexate. Clearance of psoriatic lesions was associated with a significant fall (P less than 0.05) in epidermal calmodulin, activity irrespective of the treatment modality used. Also, there was a significant reduction (P less than 0.05) in the calmodulin levels in the epidermis of uninvolved skin following successful treatment.

Effect of chronic friction in vivo on histochemical reactions in the human epidermis

The cryptic folded epidermis of skin tags [fibroma molle] was chosen as an in vivo model for investigating the effect of chronic epidermal friction. Lectin histochemistry was combined with immunohistological detection of calmodulin by a polyclonal antiserum. The latter has been shown to be a marker of normal basal keratinocytes. We observed a decrease in wheat germ agglutinin [WGA] binding to subcorneal cells, which were found in cryptic foldings with an orthohyperkeratotic horny layer. Both altered WGA binding and hyperkeratosis probably appear as adaptive mechanisms in human epidermis subjected to chronic friction